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按照物質(zhì)在兩相溶劑中分配比的不同,可以將中藥化學(xué)成分分離方法主要?dú)w為液–液萃取法、PH萃取法、柱色譜法這三種,下面就來和幫考網(wǎng)一起看看這三種方法的具體介紹吧。
1.PH萃取法
PH萃取法也是液-液萃取分離的一種,分離原理是依據(jù)兩相液體PH值大小不同達(dá)到分離目的。一般PH<3時(shí),酸性物質(zhì)多呈非解離狀態(tài)(HA)、堿性物質(zhì)則呈解離狀態(tài)(BH+)存在;但pH>12時(shí),則酸性物質(zhì)呈解離狀態(tài)(A- )、堿性物質(zhì)則呈非解離狀態(tài)(B)存在。據(jù)此,可在不同pH的緩沖溶液與有機(jī)溶劑中進(jìn)行分配,使酸性、堿性、中性及兩性物質(zhì)得以分離。
2.柱色譜法
將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上,作為固定相,填充在色譜管中,然后加入與固定相不相混溶的另一相溶劑(流動(dòng)相)沖洗色譜柱。物質(zhì)在兩相溶劑中相對作逆流移動(dòng),在移動(dòng)過程中不斷進(jìn)行動(dòng)態(tài)分配而得以分離。這種方法稱之為液-液分配柱色譜法,所用的載體主要有硅膠、硅藻土及纖維素粉等。
通常,分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物時(shí),固定相多采用強(qiáng)極性溶劑(如水、緩沖溶液等),流動(dòng)相則用三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機(jī)溶劑,稱之為正相色譜;但當(dāng)分離脂溶性化合物,如高級脂肪酸、油脂、游離甾體等時(shí),則兩相可以顛倒,固定相可用石蠟油,而流動(dòng)相則用水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑,故稱之為反相分配色譜。
常用反相硅膠薄層及柱色譜的填料系將普通硅膠經(jīng)下列方式進(jìn)行化學(xué)修飾,鍵合上長度不同的烴基(R)、形成親油表面而成。根據(jù)烴基(–R)長度為乙基(–C2H5),還是辛基(–C8H17)或十八烷基(–Cl8H37),分別命名為RP-2、RP-8及RP-18。三者親脂性強(qiáng)弱順序?yàn)椋篟P-18> RP-8> RP-2。
3.液–液萃取法
液-液萃取法是根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離,簡稱萃取法。
分離的難易用分離因子β值來表示。分離因子β可定義為A、B兩種溶質(zhì)在同一溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)的比值。就一般情況而言,β≥100,僅作一次簡單萃取就可實(shí)現(xiàn)基本分離;如果100 >β≥10,通常須萃取10 ~12次;若β≤2時(shí),要想實(shí)現(xiàn)基本分離,須作100次以上萃取才能完成;當(dāng)β≌1時(shí),則意味著兩者性質(zhì)極其相近,即使作任意次分配也無法實(shí)現(xiàn)分離。
紙色譜法的原理與液–液萃取法基本相同,只是兩相中其中一相以固態(tài)為基質(zhì),與某種液相形成飽和狀態(tài),進(jìn)而達(dá)到分離的目的。
以上三種方法各位小伙伴們都掌握了嗎?小伙伴們要抓緊時(shí)間備考了,幫考網(wǎng)相信大家都能順利通過考試。
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